細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品別名

Claycomb培養(yǎng)基是以建立HL-1細(xì)胞系的William Claycomb博士命名的，它專(zhuān)用于培養(yǎng)小鼠心肌細(xì)胞生長(zhǎng)。HL-1是第一個(gè)能夠在 體外維持分化心肌細(xì)胞表型和收縮活性的細(xì)胞系。HL-1細(xì)胞系可用于研究心肌梗塞后的心肌細(xì)胞肥大、測(cè)試新型心臟治療藥物和療法、生產(chǎn)高水平心肌蛋白以及研究成熟心肌細(xì)胞特異性基因。補(bǔ)充100 μM去、10％胎牛血清（FBS）和4mM L-的Claycomb培養(yǎng)基，

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai IgE receptor aibody ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒

Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2試劑盒人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物氨含量熒光定量試劑盒20次

Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠載脂蛋白A5(APOA5)試劑盒 ，英文名： APOA5 ELISA Kit

Mouse phosphatidylinositol aibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgM) ELISA Kit 小鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)試劑盒

MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAkit 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit人血纖蛋白原降解產(chǎn)物

細(xì)胞/組織活性溶酶體分離試劑盒10次

ELISAKitMMP-2大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A

小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子試劑盒   小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子試劑盒、小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠腦紅蛋白試劑盒   小鼠腦紅蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠腦紅蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠腦紅蛋白試劑盒、小鼠腦紅蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠腦腸肽試劑盒   小鼠腦腸肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠腦腸肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠腦腸肽試劑盒、小鼠腦腸肽試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠免疫球蛋白試劑盒   小鼠免疫球蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠免疫球蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠免疫球蛋白試劑盒、小鼠免疫球蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

鋅指蛋白799抗體

血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子（CD106）重組兔單克隆抗體

CPB1重組小鼠 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白 Protein

CaMK2a(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II alpha 0.5mgCaMK2a(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II alpha) 鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)蛋白激酶2α抗原

TP63重組人 P63 / TP63 / Tumor protein p63 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

F屬

Claycomb Medium培養(yǎng)基ACE( ACE, testis-specific isoform precursor 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(抗原)

DAPK1 Protein Human 重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標(biāo)簽)

SERPINA6重組小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白 Protein

LAMP1 Protein Rat 重組大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

FKBP7重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein