細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

B16-F10+LUC細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持B16-F10+LUC細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 B16-F10+LUC細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于B16-F10+LUC 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)基礎(chǔ)培                 445ml

特級(jí)胎牛血清                                                           50 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 大鼠3(VD3)試劑盒

Humahyroid-Peroxidase,TPOELISAKit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancoloncancer-specificaigen-4,CCSA-4試劑盒人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織AURORA-A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

humanpyridoxal/pyridoxinevitaminB6-phosphatase,PDXPELISAKit人哆/哆醇B60酸酶(PDXP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠棕櫚酰化膜蛋白2(MPP2)試劑盒 ，英文名： MPP2 ELISA Kit

Ma beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒

Mousesolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanLinkerforactivationofTcell,LATELISAKit人T細(xì)胞活化連接蛋白

土壤細(xì)菌DNA分離試劑盒50次

ELISAKitAECA大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體

山羊促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

山羊白介素4(IL-4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

山羊白介素10(IL-10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體

胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體

FGFR3重組小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 Protein

CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator 0.5mgCD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴細(xì)胞衰減蛋白(抗原)

VSTM1重組人 VSTM1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HGF Protein Human 重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

PDCD1LG2 Protein Rat 重組屬

B16-F10+luc 細(xì)胞專用培養(yǎng)基Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 0.5mgNatrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍(lán)蛋白

CREB3L1 Protein Human 重組人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 標(biāo)簽)

PDCD1重組狗 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 Protein

NTRK1 Protein Mouse 重組小鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

SIRPG重組人 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 Protein