細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

A2780/DDP細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持A2780/DDP細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含A2780/DDP細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于A2780/DDP細胞的培養(yǎng)。

本培養(yǎng)基不包含DDP藥物，需要的話可以單獨采購。細胞培養(yǎng)藥物濃度：0.5ug/mL。

產(chǎn)品主要成分

DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                           445 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒

Human ai Mi2 aibody (ai-Mi2-Ab) ELISA Kit 人抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)試劑盒

PorcineN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforALA/LCA(Humanai-lymphocytotoxicaibody)ELISAKit人抗淋巴細胞毒抗體

血液型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性熒光定量試劑盒20次

MouseUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒

兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒

Rat angiogenin (ANG) ELISA Kit 大鼠血管生長素(ANG)試劑盒

Humanadrenalcoexaibody,ACAELISAKit 人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)試劑盒 進口分裝

HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMW試劑盒人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒

組織HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20次

Humanplateletbasicprotein,PBPELISAKit人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)試劑盒

中文名稱   方法   規(guī)格

人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA. 

人抗單核細胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA. 

人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit   ELISA.

PerCP-Cy5.5標記人CD64單克隆抗體

類固醇受體激活蛋白2抗體

SELL重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein

CD31 (PECAM-1 0.5mgCD31 (PECAM-1) 血小板內(nèi)皮細胞黏附分子-1(抗原)

CCL11重組人 CCL11 蛋白 Protein

ISG15 Protein Human 重組人 ISG15 / G1P2 蛋白

SELP Protein Rat 重組大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 標簽)

A2780/DDP 細胞專用培養(yǎng)基甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲蛋白酶2(MASP2)重組蛋白 Recombinant Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

PTK6重組小鼠 PTK6 / Brk 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽)

ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標簽) Protein