細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

K1(GLAG-66)細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持K1(GLAG-66)細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含K1(GLAG-66) 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于K1(GLAG-66) 細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

F12K 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                  445 ml

特級胎牛血清                                   50 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

植物茉莉酸(JA)試劑盒

Human ai fibrillarin aibodies (AFA/snoRNP/U3RNP) ELISA Kit 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)試劑盒

Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit 豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)試劑盒分裝

CLIAKitforAFA/snoRNP/U3RNP(Humanai-fibrillarinaibody)ELISAKit人抗核仁纖維蛋白抗體

血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性熒光共振能量轉(zhuǎn)移法(FRET)定量試劑盒20次

MouseSubstanceP,SPELISAKit小鼠P物質(zhì)(SP)試劑盒

小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA 試劑盒

Rat basic fibroblast growth factor 4 (bFGF-4) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)試劑盒

HumanCytotoxin-associatedprotein,CagAELISAKit 人細胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)試劑盒分裝

Human6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1a試劑盒人6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒

正常大鼠(SpragueDawley)腸組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

MouseAi-myocardialaibody,AMAELISAKit小鼠抗心肌抗體(AMA)試劑盒

脂多糖   10mg

Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5

L-異亮酸   10g

L-Isoleucine   50g

轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體

半乳糖凝集素2抗體

HAVCR2重組小鼠 TIM3 / HAVCR2 蛋白  Protein

核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白 Recombinant Ribosomal Protein L23A (RPL23A)

TMED4重組人 TMED4 / ERS25 蛋白 (His 標簽) Protein

ACRV1 Protein Human 重組人 SP-10 / ACRV1 蛋白 (His 標簽)

ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白

K1(GLAG-66) 細胞專用培養(yǎng)基核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白 Recombinant Ribosomal Protein L23A (RPL23A)

ACRV1 Protein Human 重組人 SP-10 / ACRV1 蛋白 (His 標簽)

HAVCR2重組小鼠 TIM3 / HAVCR2 蛋白  Protein

ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 標簽)

TMED4重組人 TMED4 / ERS25 蛋白 (His 標簽) Protein